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轉(zhuǎn)染技術:脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑如何實現(xiàn)基因表達?

更新時間:2023-12-14點擊次數(shù):1442

脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑是將外源性遺傳物質(zhì)導入細胞中的普遍方法之一。第一代脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑依賴于人工脂質(zhì)體,可包裹核酸,然后與細胞膜融合,并將其內(nèi)容物沉積在內(nèi)部。新一代的陽離子脂質(zhì)體試劑通過帶負電荷的核酸與合成脂質(zhì)體試劑帶正電荷的頭基之間的靜電相互作用,自發(fā)形成凝聚的核酸-陽離子脂質(zhì)體試劑復合物。目前認為,這些復合物可通過內(nèi)吞作用被細胞攝取,然后在細胞質(zhì)中釋放進入細胞后,轉(zhuǎn)染的 DNA 易位到細胞核并表達。由此可見脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑能有效將外源基因或RNA導入細胞內(nèi)。其原理主要基于脂質(zhì)體與細胞膜的相互作用和內(nèi)吞過程。那對于具體的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑如何實現(xiàn)基因表達,一起來探討一下吧!

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1. 脂質(zhì)體成分及特點

脂質(zhì)體由磷脂和膽固醇等構成,具有雙層脂質(zhì)結構,頭部為親水性,尾部為疏水性。這種結構使得脂質(zhì)體能在水相和脂相之間形成穩(wěn)定的界面并包裹傳遞分子。

2. 脂質(zhì)體與細胞膜的互動

當脂質(zhì)體接觸細胞膜時,疏水性的尾部會與膜上的脂質(zhì)結合形成復合物。這樣可以改變細胞膜結構及通透性,使外源分子更容易進入細胞。

3. 脂質(zhì)體的內(nèi)吞過程

與細胞膜結合后,細胞膜通過內(nèi)吞作用包裹復合物進入細胞內(nèi)。這個過程被稱為脂質(zhì)體的內(nèi)吞。它將外源基因或RNA導入細胞,從而實現(xiàn)基因表達或復制。

4. 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑優(yōu)點及注意事項

高效性:脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑能夠?qū)崿F(xiàn)高效的基因或RNA轉(zhuǎn)染,使外源基因或RNA分子能夠迅速進入細胞內(nèi)。

適用性:脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑適用于多種細胞類型和實驗條件,包括原代培養(yǎng)細胞、懸浮細胞和貼壁細胞等。

安全性:脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑相對較安全,對細胞沒有明顯的毒性作用。

*注意事項:需優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件(如濃度、時間等)、確保轉(zhuǎn)染試劑和分子質(zhì)量高且細胞狀態(tài)良好。

總的來說,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑通過與細胞膜的互動和內(nèi)吞作用成功導入外源分子,實現(xiàn)了高效的基因表達。

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下期內(nèi)容:脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑哪個轉(zhuǎn)染效率更高




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