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蛋白Marker即蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn),是一些已知分子量的蛋白質(zhì)的混合物,像“尺子”一樣用來(lái)指示蛋白質(zhì)條帶的大小。在WesternBlot過(guò)程中,分子量Marker就像個(gè)螺絲釘一樣雖然是其中小小的一環(huán),然而就是這樣一個(gè)小細(xì)節(jié)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有著不可忽視的作用。Marker的作用主要是用來(lái)指示蛋白條帶所對(duì)應(yīng)的分子量大小,只有標(biāo)準(zhǔn)量精確無(wú)誤了,實(shí)驗(yàn)結(jié)果才有說(shuō)服力,除此之外,蛋白Marker還有顯示轉(zhuǎn)膜是否成功、以及蛋白在凝膠上的電泳程度等作用,因此選擇正確的蛋白Marker也是Western...
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇是在細(xì)胞研究和生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)技術(shù),用于長(zhǎng)期保存和重復(fù)使用細(xì)胞。此步驟是細(xì)胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),直接影響細(xì)胞存活率和活力,關(guān)系到后續(xù)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)芊癜凑沼?jì)劃有效地進(jìn)行。要想做好細(xì)胞凍存和復(fù)蘇,首先請(qǐng)牢記下面這四個(gè)字:慢凍快融!慢凍快融!慢凍快融!重要的事情說(shuō)三遍!那么細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中為什么要“慢凍快融”呢??jī)龃婕?xì)胞時(shí),細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境中的水會(huì)形成冰晶。如果直接將細(xì)胞凍存到-196℃的液氮中,由于凍結(jié)過(guò)程中胞外溶液中的水先結(jié)冰,使胞外溶液不斷濃縮,引起細(xì)胞電解質(zhì)升高、滲透...
在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,我們通常通過(guò)凍存的手段讓細(xì)胞代謝變得緩慢,從而達(dá)到長(zhǎng)期保存或保種的目的,以供后續(xù)實(shí)驗(yàn)的使用,那么如何讓細(xì)胞“凍”起來(lái)使之不變與永恒逐漸成為一個(gè)熱門(mén)話題,接下來(lái)一起來(lái)探究一下吧!【低溫儲(chǔ)存】隨著細(xì)胞被冷凍至冰點(diǎn)以下,懸液中冰晶和溶質(zhì)的濃度有所增加。如果冷卻過(guò)程中,胞內(nèi)水分可以滲出細(xì)胞,則可以減少胞內(nèi)冰晶。通常1℃/min的降溫速度可以促進(jìn)此過(guò)程。但是,水分的喪失會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞收縮,當(dāng)這種收縮達(dá)到一定程度,又會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞活性的劇烈下降。冷凍保護(hù)劑,如甘油或者二甲基亞砜(D...
當(dāng)你導(dǎo)師安排養(yǎng)一個(gè)沒(méi)養(yǎng)過(guò)的細(xì)胞,不知道用什么培養(yǎng)基的時(shí)候,是否也在為選培養(yǎng)基而苦惱?面對(duì)DMEM培養(yǎng)基、MEM培養(yǎng)基、F12培養(yǎng)基、1640培養(yǎng)基等種類(lèi)繁多的培養(yǎng)基時(shí)要怎么選擇呢?這種時(shí)候大家要一起記?。酣箾](méi)有什么培養(yǎng)條件是jue對(duì)正確的;ü沒(méi)有什么細(xì)胞是咱養(yǎng)不活的;ü參考文獻(xiàn)沒(méi)有那就不參考了;ü反正文獻(xiàn)也不一定是對(duì)的;但如果你的細(xì)胞沒(méi)STR鑒定過(guò),沒(méi)有親自原代分離過(guò),還各種支原體立克次氏體污染、黑膠蟲(chóng)污染,那你當(dāng)我沒(méi)說(shuō)。我勸你盡快丟掉!讓我們先科普下培養(yǎng)基的選擇。目前合成培...